自然杀伤（NK）细胞是体内重要的肿瘤杀伤免疫细胞。NK细胞对病毒感染细胞或肿瘤形成有很快的反应率。此外，NK细胞具有广泛的抗肿瘤作用，没有显示肿瘤杀伤的特异性和MHC的局限性。当其他免疫细胞（如T细胞和B细胞）功能低下时，NK细胞的功能就显得尤为重要。
目前，基于NK细胞的肿瘤免疫治疗已逐渐被发现。让我们看看有哪些策略可用？
它可以单打独斗，也可以群殴
NK细胞是抵抗肿瘤细胞和病毒感染的第一道防线，它可以直接杀死肿瘤细胞而无特异性。NK细胞可以识别这些细胞，在没有抗体或MHC的情况下产生快速的免疫反应。对于那些没有自我标记的MHC-I细胞，NK细胞可以在没有激活的情况下杀死它们。这种自然杀伤活性不需要抗原增敏、抗体1参与和无MHC限制。它不同于人体内其他类型的白细胞。它不需要来自免疫系统的特殊指令，也不需要其他细胞的合作。它能自行识别和攻击外来细胞、癌细胞和病毒。
它除了具有强大的杀灭功能外，还具有强大的免疫调节功能，与其他免疫细胞相互作用，调节机体的免疫状态和免疫功能。临床研究发现，NK细胞过继免疫治疗在恶性肿瘤的治疗中具有良好的前景，对多种实体瘤和血液系统恶性肿瘤有一定的疗效。
三种抗癌方法
NK细胞有三种抗癌作用：
通过释放孔蛋白、颗粒酶或死亡受体直接杀伤肿瘤细胞；
它们通过分泌细胞因子和趋化因子，在免疫系统中起调节细胞的作用，并激活T细胞的杀伤作用
ADCC效应（抗体依赖性细胞介导的细胞毒性）形成。当B细胞发现癌细胞时，它们会悄悄地在癌细胞上留下特异性IgG抗体作为标记，提醒NK细胞。当NK细胞看到这个标记物时，它们会起到杀戮的作用。
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目前，国际上肿瘤免疫治疗的NK细胞策略如下：
体外活化NK细胞（自体或异体）的治疗
结合NK细胞和单克隆抗体（如免疫抑制检查点抑制剂）诱导抗体特异性细胞毒性
car-nk细胞免疫治疗的构建
NK细胞体外活化的治疗策略
NK细胞可通过自身的表面受体（激活的和抑制的受体）调节自身的细胞毒性。通过激活NK细胞自身的受体是解除NK细胞免疫应答的有效途径。
激活受体途径的刺激
NK细胞表面有一系列的激活受体，如天然细胞毒性受体（NCRs）、C型凝集素（NKG2D）SLAM家族受体和CD16。这些活化受体与配体结合后，可诱导IFN-γ、TNF-α等细胞因子的分泌。
IL-15
临床前和早期资料均显示IL-15可诱导NK细胞数量增加。IL-15一方面有助于跨越免疫关卡的抑制机制，另一方面可以改善NK细胞CD16介导的功能。目前，IL-15已成为免疫治疗的新靶点。
CD16
NK细胞也表达低亲和力受体FCγRIII（CD16）。CD16可与肿瘤抗原特异性抗体FC段结合，介导NK细胞识别和杀伤被抗体包围的肿瘤细胞，即ADCC。与其他活化的NK细胞受体不同，CD16与FC的结合不需要共活化，可以产生强烈的反应。这也使NK细胞能够在病毒感染和肿瘤形成的早期通过抗体产生免疫反应。ADCC是NK细胞杀伤靶细胞的主要途径。
此外，我们还设计了一种以CD16和NKG2D为靶点的双特异性分子，能够靶向NK细胞识别和杀伤肿瘤细胞。（双特异性分子被设计用来识别肿瘤抗原，这些抗原激活NK细胞受体与另一端结合，从而使NK细胞杀死过度表达这些抗原的肿瘤细胞。）
结合免疫检查点抑制剂
虽然NK细胞对肿瘤的反应调节并不依赖于对肿瘤相关抗原的识别，但也存在着免疫检查点的激活或抑制机制。肿瘤细胞能表达NK细胞免疫检查点配体，抑制NK细胞介导的肿瘤细胞溶解。因此，为了限制这种抑制作用，人们开发了一系列肿瘤NK细胞免疫抑制检查点抗体。
阻断“抑制性受体”途径
NK细胞表面表达多种抑制性受体，如KIR（免疫球蛋白样受体）C型凝集素受体（nkg2a）中常见的免疫检查点受体PD-1、Tim-3、LAG-3、tigit等，它们能与MHCⅠ类分子结合，抑制NK细胞的活化。
体外实验表明，iph2102单抗阻断kir2dl1-3可提高NK细胞的抗肿瘤活性。它可以通过抑制NK细胞的KIRs对不识别MHCⅠ类表达的转移性肿瘤细胞的杀伤作用。此外，针对NK细胞相应抑制性受体的抗体能显著提高NK细胞的杀伤效果。
此外，研究人员还检测了多发性骨髓瘤患者NK细胞PD1的表达。PD1 MAb（ct-011）的应用可以修复NK细胞介导的抗肿瘤作用，此外，pdl1igg1mab的应用还可能刺激NK细胞的ADCC。
其中，AndréP等人。研制了抗NK细胞抑制受体nkg2a的人源化抗体monalizumab，并对其在体外对多种肿瘤细胞系（包括HNSCC细胞系和小鼠体内）的作用进行了评价。发现当与其他单克隆抗体如DurvutAb（抗PD1单克隆抗体）或EGFR单克隆抗体和西妥昔单抗一起使用时，它具有加性效应。
结合免疫检查点抑制剂和其他NK定向免疫疗法，它可用于靶向各种类型的肿瘤，这些肿瘤目前对现有疗法无反应。
汽车nk细胞治疗
嵌合抗原受体修饰NK细胞能显著提高NK细胞的疗效和特异性，其原理是通过在NK细胞表面构建嵌合肿瘤特异性抗原受体，使NK细胞靶向识别和破坏肿瘤细胞。一些研究表明，NK细胞比ADCC具有更强的细胞毒作用。
在car的应用中，NK细胞优于T细胞
异基因NK细胞不会引起GVHD，已经在许多临床试验中得到证实。
NK细胞不分泌引起细胞因子释放综合征的炎症因子，如IL-1和IL-6。
除了car介导的靶向杀伤外，car-nk细胞还可以通过nk细胞的抗肿瘤特性识别和杀伤car靶向下调或缺失的肿瘤细胞，从而提高免疫治疗效果。
异基因NK细胞来源广泛，包括外周血、NK细胞系、脐血、诱导多能干细胞、NK-92细胞系等。
目前，关于car-nk的临床试验很多，大多集中在血液肿瘤的研究上，试图解决car-t不能解决实体瘤的问题。在实体瘤的治疗中，研究人员开发了多种靶向肿瘤相关抗原的car-nk细胞，如gD2、EGFR和PSCA。CAR修饰的NK细胞对表达相应抗原的靶细胞具有更强的细胞毒作用。其中以NKG2D为胞外结构域的汽车结构最为特殊。NKG2D可与多种肿瘤表面配体结合，具有广谱抗癌作用。nkg2d-dap10-cd3ζ构建的car-nk细胞对骨肉瘤、前列腺癌、横纹肌瘤等肿瘤具有良好的杀伤作用。
综上所述，我们可以总结出下图来发展一系列NK细胞免疫治疗癌症的方法。
？？NK细胞电位治疗方法示意图
后记
一般来说，有三种方法可以使用NK来对抗肿瘤：激活NK细胞，减轻NK细胞的免疫抑制，并控制NK细胞毒性。
NK细胞作为仅次于T细胞的第二大免疫细胞，在肿瘤治疗中有着特殊的地位。虽然NK细胞疗法的发展可以参考现有的T细胞治疗，但也应该注意到这两种免疫细胞具有不同的作用机制。为了真正发挥NK细胞的抗癌作用，需要对其分子特性和功能进行进一步的探索和验证。
